طراحی کیت آنتی بادی ضد فاکتور پری نوکلئر (apf) به روش ایمنوفلورسانس و ارزیابی آن در بیماران آرتریت روماتوئید

سابقه و هدف: آرتریت روماتویید از بیماری های روماتیسمی منتشر خود ایمن است. در این بیماری، اتوآنتی بادی هایی کشف شده اند که از نظر تشخیص و پیش آگهی با ارزش می باشند. یکی از این آنتی بادی ها، آنتی بادی ضد فاکتور پری نوکلئر است که با گرانول های کراتوهیالن سلول های مخاطی دهان واکنش می دهد. بنابراین ابتدا کیت apf-ifa را طراحی و سپس میزان آنتی بادی را در بیماران آرتریت روماتوئید بررسی نمودیم.مواد و روش ها: طراحی کیت شامل: 1- شناسایی کننده های مناسب؛ 2- آماده سازی سویسترای آنتی ژنیک و 3- بهینه سازی روش وکنترل کیفیت می باشد.این روش براساس اتصال apf با گرانول های کراتوهیالن سلول های مخاطی دهان شناسایی آن با استفاده از آنتی هیومن گلویولین تام کونژوگه به ماده فلورسنت می باشد. پس از کالیبراسیون کونژوگونه، سنجش apf بارقت های 5/1 و 10/1 تا 1280/1 در سه گروه بیماران آرتریت روماتویید [52 نفر با میانگین سنی [(48±15.8)، گروه کنترل بیمار [23 نفر با میانگین سنی [(32.5±16.9) و گروه کنترل سالم [30 نفر با میانگین سنی [(32.1±16.9) انجام شد.یافته ها: از 52 بیمار آرتریت رماتویید 37 مورد (71.2 درصد) apfمثبت و در گروه کنترل بیمار 2 مورد (8.7 درصد) و در گروه کنترل سالم یک مورد (3.3 درصد) apfمثبت بود.کیت طراحی شده apf از دقت 98 درصد به روش inter and intra assay برخوردار بوده و حساسیت و اختصاصی بودن تست apf در رقت 5/1 سرم به ترتیب 71.2 و 94.3 درصد بوده است. استنتاج: با توجه به نتایج، بهترین حساسیت و اختصاصی بودن آزمایش برای بیماران آرتریت روماتویید، تیتر 5/1 بود؛ یعنی رقت 5/1 به عنوان cut off یا حداقل تیتر معنی دار در تشخیص و تایید آرتریت روماتویید می باشد و با توجه به دقت 98 درصدی کیت طراحی شده سنجش apf-ifa دارای اعتبار تشخیص متوسط و تاییدی بالا برای آرتریت روماتویید است. همچنین مقایسه بین گروه های مورد آزمایش نشان داد که بین غلظت apf و شدت بیماری ارتباط معنی دار وجود دارد (p=0.05). در حالی که ارتباط معنی دار بین تیتر apf و ابتلای خارج مفصلی، ظرفیت علمی، جنسیت، سن، سن شروع بیماری و مدت بیماری دیده نشد.